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精品推荐 | GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒

谷胱甘肽(Glutathione)是一种由3个氨基酸残基（甘氨酸、谷氨酸和半胱氨酸）组成的小肽，保护细胞免受活性氧如自由基和过氧化物引起的细胞损伤，主要以还原性谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione disulfide, GSSG)两种形式存在。
 
图1.GSH和GSSG之间的转化

 

在谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)催化的反应中，两个GSH分子通过巯基脱氢形成二硫键而产生GSSG。此外，谷胱甘肽还原酶(GR)氧化β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(β-NADPH2)的同时会将GSSG转变为GSH。
 
 
50120 GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒（绿色荧光）
 

 

－高灵敏性！－适用范围广！－操作简单！

 

该试剂盒采用一种特殊的非荧光和pH依赖性谷胱甘肽探针Thiolite Green，通过与GSH反应发出强烈荧光(Ex/Em=490/520 nm)，定量分析样品中的GSH含量；通过GSSG Probe将GSSG还原成GSH后再定量分析GSSG的含量。

 

 
50120ES GSH/GSSG比例检测步骤汇总
 

 

 
 
50120ESGSH/GSSG比例荧光检测试剂盒（绿色荧光）测定的标准曲线
 
 
图2.GSH标准曲线
 
图3.Total GSH标准曲线（横坐标为GSSG标准液浓度(0.0781-2.5 µM)换算成相应GSH浓度）

 

 

FAQ
 

 

Q1：可以用试剂盒中Assay buffer代替裂解液裂解细胞吗？
A：不行，因为Assay buffer中不含有去垢剂，因此不适用于裂解细胞，建议使用含0.5% NP-40的PBS (pH4-6)作为裂解液。
 
Q2：裂解液中可以含有DTT吗？
A：不行，因为DTT具有还原性，会影响反应。
 
Q3：所有的标准品和样品检测出来的荧光值一样，有可能是什么造成的？
A：有可能是GSH被氧化。
 
Q4：该试剂盒能用于血清和血浆检测吗？
A：可以，但是对于血清样本，在分析之前需要先对样本进行脱蛋白处理。
 
Q5：两条标准曲线该如何选择？
A：在检测还原性谷胱甘肽(GSH)使用GSH standard curve；在检测Total GSH使用GSSG standard curve，但由于GSSG是在酶促反应后转化为GSH进行检测的，1 mol GSSG=2 mol GSH，所以GSSG standard curve的横坐标Total GSH浓度是GSSG标准品浓度的两倍。
 
Q6：该试剂盒灵敏度？
A：该试剂盒可以检测浓度最低为10 nM的GSH。

 

 

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产品名称

产品货号

规格

GSH/GSSG Ratio Fluorimetric Detection Assay Kit (Green Fluorescence) GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒（绿色荧光）

50120ES

200 T
 

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